登革热NS1抗原快速检测试剂盒

预期用途

此试剂盒用于登革热病毒的早期检测，通过酶免分析法检测人血清中的NS1抗原。它可以在IgG和IgM抗体出现之前对人血清中的登革热病毒的进行早期诊断。此试剂盒具有高灵敏度，快速和可靠性分析，采用夹心法检测血清中低含量的NS1。

登革热NS1（非结构蛋白）蛋白是一个六聚体分泌的蛋白。它是病毒RNA复制中重要的角色，它强烈的免疫原性引起抗体和补体的活性。在急性感染血液中可检测到NS1抗原。此试剂盒可检测即时感染患者血清中的NS1抗原。

此色谱层析条可用于人血清中NS1的定性检测。它可以在IgG和IgM抗体出现之前对人血清中的登革热病毒进行早期诊断，仅用于研究

实验原理

登革热NS1快速检测是基于人血清中NS1抗原检测的免疫试验。试验区纤维膜上包被有NS1特异性抗体，还设置了独立的质控区，以确保试验的有效性。试验中，将样本直接加至样本加样区，然后将其放置在含有3滴缓冲液的贮存孔内，样本与缓冲液混合，然后与胶体金结合的NS1特异性单抗反应，液体在纤维膜上移动（毛细血管作用），与纤维膜上包被的抗NS1抗体反应，如果样本中存在抗原，试验区就会出现红色条带，如果试验操作正确，质控区也会出现红色条带，则表示试验有效

整个试验过程大约30min

试剂盒组成

1. 快速检测条：25人份

2. Chase缓冲液，1瓶，6ml，室温贮存

3. 64个贮存微孔

实验所需材料但试剂盒未提供

1. 移液器和枪头，5-50ul

样本采集与准备

1. 此试验只能使用人血清，由于试剂未得到优化，所以不能直接用于全血或血浆的检测

2. 从红细胞凝块中提取出血清，不能使用溶血

3. 样品采集后应尽快进行实验，不要将血清长时间放置在室温下

4. 采取静脉穿刺采血，样品在2-8℃下可保存7天，-20℃或更低温度可保存30天，想要保存更长时间，应贮存在-70℃，避免反复冻融

5. 使用前应将冻存的样品在室温下溶解

6. 如果血清是需运输的，则需根据联邦感染试剂运输法规进行包装运输

实验步骤

实验开始前，将快速检测条和试验样本平衡至室温，确保无物理损坏（如纤维膜刮伤，衬垫撕裂等），试验中可以采用类似于酶免96孔板的贮存微孔，不能重复使用样本贮存孔

1. 加3滴（大约120ul）Chase缓冲液至微孔中

2. 样本底板上（sample pad ）加50ul的试验样本，样本底板位置在箭头的之间，见下图。不要将样本加至缓冲液底板（buffer pad ）

3. 立即将快速检测条放入贮存微孔内，确保样本侧向下朝微孔方向，如果20秒内未出现红色条带，轻轻拍打样本底板以上的箭头部位，使样本和酶联物移动

4. 30min后立即读取结果，超过了45min则会导致错误的结果

结果说明

阳性结果：当质控区和样本区都出现了红色条带时则判断为阳性，条带模糊也判定为阳性

阴性结果：只有质控区出现了红色条带，试验区并没有时则认定实验结果为阴性

试验无效：质控区无红色条带出现则试验无效，如果质控线没有但试验区出现红色条带则试验也为无效，检验重新采样检测