黑热利什曼原虫RK39-IgG+IgM抗体检测试剂盒（ELISA)说明书
——仅供体外研究使用，不用于临床诊断!

利什曼原虫属于通过白蛉传播的一类寄生性原虫，它能够感染人类和动物，进而引发利什曼病。在众多对人致病的利什曼原虫种类中，超过20种，其中杜氏利什曼原虫的危害最为严重。利什曼病在 的热带、亚热带以及部分温带地区广泛流行，被世界卫生组织认定为被忽视的热带病之一。目前，全世界有88个国家曾报告过利什曼原虫症的病例，感染人数多达1200万，每年新增病例大约有150万例。

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组 织匀浆及相关液体样本中人利什曼原虫抗体（Leishimaria Ab）的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃

[实验原理]

试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人利什曼原虫抗体（Leishimaria Ab）捕获抗原的包被微孔中，依次加入标本、标准 品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人利什曼原虫抗体（Leishimaria Ab）呈正相关。用酶标 仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

【自备材料 】

需要准备蒸馏水。 加样器，规格有5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。 还有振荡器以及磁力搅拌器等设备。

[样本处理及要求]

1.血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.血浆：用EDTA或肝 素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.组 织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组 织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细 胞会影响测量结果），称重后将组 织剪碎。将剪碎的组 织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组 织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白 酶抑制 剂）加入玻 璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组 织细 胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4.细 胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

[需要而未提供的试剂和器材]

1.酶标 仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

4.蒸馏水或去离 子水

[试剂盒组成]

寄生虫是一类依赖宿主（人或动物）生存的生物，它们通过寄生在宿主体内或体表获取营养，同时可能引发疾病——

阿米巴虫病检测试剂盒 钩 虫病检测试剂盒 姜 片虫病检测试剂盒 弓形虫病检测试剂盒 毛滴 虫病检测试剂盒 疟 原虫检测试剂盒 莱姆病检测试剂盒 森林脑 炎检测试剂盒

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