支原体ELISA检测试剂盒 使用说明书

仅供体外研究使用，不用于临床诊断

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人支原体（MP）的含量。

有效期：6个月

保存条件：2-8℃

[实验原理]

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人支原体（MP）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人支原体（MP）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

[样本处理及要求]

1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

[需要而未提供的试剂和器材]

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

4.蒸馏水或去离子水

[试剂盒组成]

预防措施

个人卫生：勤洗手、使用纸巾或肘部遮掩口鼻或，避免与患者密切接触，是预防的基本措施。

环境卫生：保持生活和工作环境的清洁和通风，可以减少病原体的传播。

避免密集场所：在流行季节，尽量避免去人群密集的地方，以减少感染的风险。

早诊早治：出现时，应及时就医，早期诊断和 可以防止病情恶化。

管理主要依靠临床的观察和 ，目前还没有针对支原体的疫苗。因此，采取适当的预防措施，加强个人和公共卫生是控制传播的关键。

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