利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)ELISA试剂盒
仅供体外研究使用，不用于临床诊断!
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人利什曼原虫抗体（Leishimaria Ab）的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃

[实验原理]

试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人利什曼原虫抗体（Leishimaria Ab）捕获抗原的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人利什曼原虫抗体（Leishimaria Ab）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

[样本处理及要求]

1.  血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.  组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

[需要而未提供的试剂和器材]

1.酶标仪（450nm）

2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒温箱

4.蒸馏水或去离子水

[试剂盒组成]

利什曼原虫，一种微小的鞭毛虫，在动质体目锥体虫科动物中占据着特殊的地位。这种原虫主要寄生于哺乳动物、爬行类等动物体内，给宿主带来一系列健康问题。在医学领域，利什曼原虫引发的疾病统称为利什曼病，其分布广泛，影响深远。

利什曼原虫的种类繁多，其中寄生于人体的主要有三种，其中杜氏利什曼原虫的危害尤为严重。这种原虫主要寄生于人体的肝、脾、淋巴腺等细胞之内，通过其微小的鞭毛在细胞内移动并繁殖。当人体被感染后，会引发，这是一种严重的疾病，患者会出现发热、、等。如果不及时 ，死亡率高达90%以上，是
我国五大寄生虫病之一。

利什曼病的传播主要依赖于特定的媒介，如白蛉子。这些吸血的小昆虫在吸食了带有利什曼原虫的动物血液后，原虫会在其体内繁殖形成细。当白蛉子再次吸食人血时，细就会被接种到人体内，使人感染。此外，病犬也是利什曼病的重要传播源，因此，在疫区，消灭病狗也是预防利什曼病的重要手段之一。

利什曼病在 范围内的分布广泛，主要流行于非洲、亚洲、欧洲南部和南美洲等地。在我国，皮肤利什曼病最早发现于20世纪80年代，新疆和台湾有病例报道，患者以青壮年为多。随着 化的推进和气候变化的影响，利什曼病的传播范围也在不断扩大，对 公共卫生构成了严重威胁。

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