免疫层析法检测黄曲霉毒素M1试剂盒 

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是一类基本结构都含有二呋喃环和香豆素（氧杂萘邻酮）的化合物。黄曲霉毒素在长波紫外光下产生荧光，根据荧光颜色、RF值及结构不同等分别命名为B1，B2，G1，G2，M1，M2，P1，R1，GM和毒醇。其中以B1的产量*，毒性*，致癌性*，G1和M1的毒性次之。样品中AF的含量可通过薄层层析显示的荧光检出量来测定 [4]  。1961年即发现黄曲霉污染的花生饼能诱发大鼠肝癌，1962年鉴定并证明了黄曲霉毒素为强致癌物。结构中二呋喃环末端带有双键的黄曲霉毒素，易形成环氧化代谢产物而使其毒性、致癌性和致突变性增强。黄曲霉毒素主要污染粮油及其制品，如花生、花生油、玉米、大米及棉籽等。国内食品检测中以黄曲霉毒素B1作为污染指标，可通过薄层层析法和高压液相法检测。 

  1 原理及用途
本产品应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成，用于检测谷物、饲料等样本中的黄曲霉毒素（aflatoxin ，afb1）。
样本溶液滴入检测卡的加样孔后，样本溶液中的黄曲霉毒素与金标抗体相结合，从而阻止金标抗体与纤维素膜上黄曲霉毒素偶联物结合。当样本溶液中的黄曲霉毒素含量大于检测限时检测线不显色，结果为阳性；当样本溶液中黄曲霉毒素含量小于检测限时检测线显紫红色，结果为阴性。
2 技术指标
2.1 试剂卡灵敏度：1ppb（ng/ml）
对样本的最终检测限须以试剂卡灵敏度乘以样本处理的稀释比例。
2.2 样本检测下限：
谷物、饲料、粮油……………5ppb
3 试剂盒组成
检测卡…………………………50个/盒
说明书…………………………1份
4 需要的器材和试剂
4.1 仪器：均质器 、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：单道20μl-200μl，100μl-1000μl
4.3 试剂：甲醇，正己烷
5 样本前处理
5.1 样本处理前须知：
实验器具必须洁净并使用一次性吸头，以避免污染干扰实验结果。

5.2 配液：
配液1：样本提取液
    70%甲醇，即v甲醇:v去离子水=7:3。
5.3 样本前处理步骤：
5.3.1 谷物、饲料
1）称取2g粉碎样本于离心管中，再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液
检测下限 5ppb 10ppb 20ppb 50ppb
样本提取液 4ml 8ml 16ml 40ml
振荡5分钟，室温4000转/分离心5分钟。
2）取0.1ml上清，加入0.15ml去离子水，混匀备用。
5.3.2 粮油（菜油、麻油、色拉油、花生油等）
1）称取1g样本于离心管中，再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液
检测下限 5ppb 10ppb 20ppb 50ppb
样本提取液 2ml 4ml 8ml 20ml
然后加入8ml正己烷，振荡5分钟，室温4000转/分离心10分钟。
2）去除上层液体，取0.1ml下层液体加入0.15ml去离子水，混匀备用。
6 实验步骤
6.1 撕开检测卡铝箔包装袋，取出检测卡，放于平整、洁净的台面上。
6.2 用配套吸管吸取已准备好的样本液体，缓慢、逐滴的（应避免泡沫产生）滴加2-3滴（约60ul）到加样孔（s）内。
6.3 室温下放置8-10分钟判断结果。超过10分钟的结果只能作为参考。
7 结果判断
阴性：在检测窗内，检测线（t）及对照线（c）同时出现色带。
阳性：在检测窗内，只有对照线（c）出现一条紫红色线。
失效：在检测窗内，对照线（c）不出现紫红色线。
 8 注意事项
8.1 过期或铝箔袋破损的产品，均不可使用。
8.2 检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开，打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。
8.3 不要触摸检测卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用，以免交叉污染。
8.5 待检样本溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染，否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象，从而影响实验结果的判定。
9 贮藏及保存期
储藏条件：试剂盒于2-30℃干燥环境下保存。
保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。

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