植物DNA提取试剂盒（快速型）

产品特点：

植物DNA提取试剂盒采用独特的疏水膜技术，彻底去除植物组织细胞中蛋白和大部分 RNA 等各种干扰物，提取高纯度的DNA。试剂盒采用独特的缓冲系统，可从绝大多数不同类型的植物包括水稻，小麦，玉米，拟南芥和大豆等植物中快速提取基因组 DNA。一般情况下，100 mg 新鲜组织的基因组 DNA 产量可达 5-30 μg。

操作步骤：

（一）平衡吸附柱

1. 取一TM Mini Column 柱装在一个 2 ml 收集管上（已备）。加入 300 μl Buffer KB 平衡液至柱子内，室温 13 000 rpm 离心 1 min，使平衡液完全流过柱子。弃收集管中的滤液，将空柱套回收集管内。注意：柱子不平衡，将导致 DNA 产率减少。

（二）样品处理

2. 组织破碎：可根据不同样品研磨难易程度选择以下方法：

1）液氮研磨：将 50-100 mg 组织直接放入研钵，加入少量液氮，迅速研磨，再加少量液氮，再研磨，如此三次，将样品研成粉末。用药匙迅速将样品干粉按 100 mg 织/1000 μl KBL1 的比例加入一新的 2 ml 离心管中。加入 KBL1 后，震荡混匀。室温 13 000 rpm 离心 2 min。

2）直接研磨：对于新鲜植物组织，将 50-100 mg 组织直接放入研钵，按 100 mg 组织/1000 μl KBL1 比例加入 KBL1，直接在 KBL1 中将样品研磨匀浆后，转入 1.5 ml 离心管（推荐）。室温 13 000 rpm 离心 5 min。弃去沉淀，上清液待转移。注意：1）上述的推荐体积为使用的 KBL1 的最小体积比例。基因组DNA 的纯度取决于 KBL1 的体积和标本的量，理论上 KBL1 的体积越大，样本的量越少， DNA 质量越好！ 不同的植物组织有不同的*比例，请在正式实验前摸索。

2）尽量使用新鲜样品，或者样品取得后立即直接保存于液氮或者-70 ℃。

（三）吸附

3. 将上清液转移到平衡过的吸附柱内，室温 13 000 rpm 离心 30 s，使裂解液完全流过柱子。弃去收集管中的过滤液，把柱套回收集管中。注意：1）室温太低可能造成 KBL1 混浊或沉淀，在 37 ℃温浴片刻即可。

2）如上清液体积过大，可以分成数次上柱，每次不要超过 700 μl。

4.（可选）加入 30 μl 浓度为 20-50 μg/ml 的 RNase A 于柱的膜上，37 ℃放置 5-10 min。

注意：本试剂盒没有配备 RNase A 溶液。一般来说，这一步没有必要，因为本试剂盒的纯化柱对 RNA 没有吸附能力。如果实验要求不能残留微量RNA，可采用这一步处理。

(四) 漂洗5. 加入 700 μl Buffer KW1，室温 13 000 rpm 离心 30 s，弃去收集管中的过滤液，保留柱。

6. 加入 700 μl Buffer KW，室 温 13 000 rpm 离心 30 s，弃去收集管中的过滤液，保留柱。注意：Buffer KW 在*使用之前必须加入 50 ml 无水或

95%乙醇，并置于室温下保存。

7. （可选）重复用 700 μl 70%乙醇（室温）洗涤柱子，室温 13 000 rpm离心 1 min。（注意：用 70%乙醇漂洗有利于提高 DNA 纯度）

8. 弃去收集管中的滤液，将空柱套回收集管内。室温下，13 000 rpm 离心 2 min 以甩干柱子基质残余的液体。注意：此步骤不可省，否则将导致乙醇残留于 DNA 中，影响后续反应。

(五)洗脱

9. 把柱子装在一个新的 1.5 ml 离心管上，加入 50 μl 的 KE（可用灭菌的 TE 10 mM Tris-HCl，pH 8.0 或纯水代替，纯水可预先用 NaOH 调 pH 值

至 8.0），65 ℃放置 5-10 min，13 000 rpm 离心 1 min 以洗脱 DNA。（也可以将 KE 预热至 65℃，再加至膜上，可以减少放置时间至 1min）注意：小心加 KE 到柱中吸附膜的中间部位，并确保液体将膜全部覆盖。

10．DNA 应保存于 4 ℃，若长时间保存，可冻存于-20 ℃。

 基因组DNA提取试剂盒系列：

总RNA提取试剂盒（离心柱型）

质粒DNA小提试剂盒（离心柱型）

无内毒素质粒DNA小提试剂盒（离心柱型）

无内毒素质粒DNA大提提试剂盒（离心柱型）

DNA胶回收试剂盒（离心柱型）

动物组织和细胞基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）

血液基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）

细菌（G-）基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）

微生物基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）

植物基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）

特殊植物基因组DNA提取试剂盒（离心柱型）

土壤总DNA提取试剂盒（离心柱型）

粪便总DNA提取试剂盒（离心柱型）

食品总DNA提取试剂盒 （离心柱型）

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